Ante un posible problema de fertilidad, los médicos suelen recomendar una variedad de tests para definir las causas. La prueba FISH en espermatozoides es una de estas, en especial cuando los tratamientos de reproducción asistida no resuelven el problema. Este tipo de test siempre debe ser realizado en el marco de un seguimiento con un profesional de la salud.
¿Qué es la Hibridación In Situ Fluorescente (FISH)?
La técnica se llama FISH por sus siglas en inglés, que significan Hibridación In Situ Fluorescente. Se trata de una técnica citogenética útil para estudiar las aneuploidías y reorganizaciones estructurales en todo tipo de células. En el caso del estudio de la fertilidad masculina, la técnica se realiza en los núcleos de los gametos masculinos en muestras de semen.
Esta técnica diagnóstica permite analizar, mediante sondas fluorescentes de ADN, parte del material genético de los espermatozoides. La finalidad del FISH es el estudio de algunos cromosomas específicos de los espermatozoides. Estos cromosomas se encuentran en el interior del núcleo en la cabeza de los espermatozoides y están en interfase, es decir, la fase del ciclo celular en la que los cromosomas no están compactados.
El análisis habitual evalúa los cromosomas 13, 18, 21, X e Y, debido a que tienen más posibilidades de estar alterados, pero existe la posibilidad de ampliarlo a más cromosomas. Con esta técnica lo que se busca es detectar la dotación cromosómica, lo que quiere decir: cuántas son las copias de cada uno de los cromosomas analizados en los espermatozoides.
Según el Dr. Sergio Rogel, ginecólogo especialista en reproducción asistida, el objetivo del FISH de espermatozoides es comprobar que cada uno de los espermatozoides tiene un cromosoma, y solo uno, de tal forma que cuando se una a un óvulo se consiga un individuo completo, al que no le falte nada y no le sobre nada.
Espermatogénesis y Errores Cromosómicos
El proceso por el cual se producen los espermatozoides es la espermatogénesis. Se realiza en el interior de los testículos, dentro de unas estructuras redondeadas llamadas túbulos seminíferos. Este proceso se da continuamente en hombres adultos.
Los espermatozoides son las células sexuales del hombre, los gametos masculinos. Son células haploides, lo que quiere decir que poseen la mitad de la dotación cromosómica de la especie. El proceso de espermatogénesis debe pasar de células somáticas con 46 cromosomas (diploides) a células sexuales con 23 cromosomas (haploides) mediante la meiosis.
Durante la formación de los espermatozoides, se pueden producir errores en alguna de las etapas de la meiosis. Si este proceso de división celular no ocurre de forma adecuada, no se lleva a cabo un reparto equitativo de los cromosomas y se generan gametos con anomalías cromosómicas.
Los hombres pueden presentar un porcentaje de espermatozoides con un número de cromosomas diferente a 23. Sin embargo, si ese porcentaje está dentro de unos valores de referencia, se va a considerar normal. Si el porcentaje de espermatozoides con un número de cromosomas diferente a 23 sobrepasa los valores de referencia, hay un mayor riesgo de transmitir anomalías cromosómicas a la descendencia.
El Proceso de la Técnica FISH Paso a Paso
La técnica del FISH consiste en llevar a cabo un análisis indirecto del contenido cromosómico en el núcleo interfásico de los espermatozoides. Para ello, el varón debe obtener una muestra de semen con una abstinencia mínima de 2 días, la cual será entregada en el laboratorio para su análisis.
El procedimiento del FISH que se realiza en el laboratorio se divide en varias etapas:
- Fijación de los espermatozoides: Se procesa la muestra de semen y los espermatozoides se fijan en un portaobjetos, preparando una dilución y extensión.
- Descondensación de la cromatina: Este paso es crucial debido al pequeño tamaño de la cabeza de los espermatozoides y a la compactación de la cromatina en el interior del núcleo. La cromatina es la sustancia que se localiza en el núcleo de las células formando el material cromosómico durante la interfase, compuesta por ADN y proteínas.
- Desnaturalización e hibridación: Mediante técnicas citogenéticas, se desnaturaliza el ADN y se hibridan los espermatozoides con las sondas fluorescentes específicas para cada cromosoma a estudiar. Las sondas más utilizadas son para la visualización de los cromosomas 13, 18, 21, X e Y.
- Detección de la cromatina.
- Visualización e interpretación: La visualización se lleva a cabo con un microscopio de fluorescencia y se observa la señal de una gran cantidad de espermatozoides. Se analizan entre 500 y 2000 espermatozoides contando las señales de las sondas en cada uno de ellos, comparando los resultados con los valores de muestras de una población control. Se considerarán espermatozoides normales aquellos que presentan una única señal fluorescente para cada cromosoma analizado.
Guía paso a paso de la técnica FISH.
Indicaciones para la Realización del FISH en Espermatozoides
En un estudio de fertilidad masculino, no es común realizar el FISH en espermatozoides de forma rutinaria. Esta prueba se suele solicitar cuando existen fallos previos de implantación, abortos de repetición o al tener una sospecha de que el contenido genético de los espermatozoides está alterado. Otros casos donde también se recomienda realizar el FISH en el esperma del varón son los siguientes:
- Pacientes con fallos de implantación en ciclos previos con ICSI convencional.
- En casos de abortos de repetición.
- Edad del varón avanzada.
- Embarazos previos con una cromosomopatía, acompañado de un cariotipo alterado.
- Pacientes sometidos a tratamiento oncológico (radio o quimioterapia).
- Esterilidad de origen desconocido.
- Alteraciones en el cariotipo.
- Varones con alteraciones seminales como oligozoospermia (baja concentración), astenozoospermia (baja movilidad) y/o teratozoospermia (morfología anormal).
Interpretación de los Resultados y Consecuencias de un FISH Patológico
Una vez se obtiene el resultado, se informa al paciente sobre los índices de error en la meiosis de sus espermatozoides. Si estos índices están dentro de la normalidad, el FISH indica que ese hombre presenta espermatozoides con un contenido genético normal en su eyaculado.
El FISH permite determinar el porcentaje de espermatozoides con alteraciones cromosómicas en el semen del varón. Si se observa alguna alteración que indique una mayor proporción de espermatozoides con una alteración cromosómica determinada, este hecho indica el riesgo de producir embriones portadores de alteraciones cromosómicas. Dichos embriones pueden tener una baja probabilidad de implantar y una alta tasa de aborto.
Una muestra con un alto porcentaje de espermatozoides con aneuploidías puede originar un mayor número de embriones con alteraciones, lo que se traducirá en bajas tasas de implantación y alta tasa de abortos.
Para la evaluación del FISH, se deben analizar espermatozoides con contornos definidos y no superpuestos. Todas las señales de hibridación deben estar perfectamente localizadas en el interior del núcleo. Además, en los casos que se detecten más de una señal para cada cromosoma analizado, todas las señales deben de tener la misma intensidad.
Opciones Reproductivas tras un FISH Patológico
Si se observa alguna alteración significativa en el FISH que indique una mayor proporción de espermatozoides con anomalías cromosómicas, sería recomendable recurrir a algunas de las siguientes opciones:
- Realizar un diagnóstico genético preimplantacional (DGP) para comprobar que el embrión no presenta alteraciones y realizar la transferencia embrionaria con aquellos que tienen una mayor probabilidad de implantarse y evolucionar, puesto que genéticamente son normales.
- Realizar un diagnóstico prenatal en caso de gestación.
- Recurrir a un tratamiento con semen de donante en los casos de alteraciones muy graves.
Por tanto, la técnica de FISH no es un método de selección espermática directo, sino que es una prueba diagnóstica que ayuda a elegir la mejor opción reproductiva en función de los resultados obtenidos. En los casos donde hay un alto porcentaje de espermatozoides con alteraciones, estaría indicado el análisis de los embriones mediante técnicas de PGT.
Preguntas Frecuentes sobre el FISH en Espermatozoides
¿Cuál es el límite a partir del cual se considera alterado el resultado del FISH?
En las pruebas de FISH, en forma general, se podría afirmar que los valores suelen considerarse alterados si son mayores de 3.1. Sin embargo, esto puede variar ligeramente dependiendo del cromosoma analizado (13, 18, 21, X, Y), y cada caso particular debe ser evaluado por un especialista.
¿Es lo mismo el test de fragmentación espermática y el FISH?
No, no son lo mismo. El test de fragmentación espermática evalúa el daño en el ADN del espermatozoide, mientras que el FISH analiza el número de cromosomas (aneuploidías y reorganizaciones estructurales).
¿Es conveniente hacer FISH en todos los hombres?
No, no es conveniente realizar el FISH en espermatozoides de forma rutinaria en todos los hombres. Se solicita en casos específicos donde hay una sospecha de alteraciones cromosómicas o problemas de fertilidad inexplicables, como abortos de repetición o fallos de implantación.
¿Qué consecuencias se pueden esperar después de un FISH patológico?
Las consecuencias que se pueden esperar después de un resultado de FISH patológico son una menor tasa de implantación, una menor tasa de gestación, una mayor tasa de aborto y un mayor riesgo de malformaciones o cromosomopatías en la descendencia.
¿Cuál es el precio de la técnica de FISH?
El precio para realizar un FISH depende de cada clínica o centro, pero suele rondar los 200-300 euros.
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