La reproducción asistida ha experimentado avances significativos, y uno de los pilares fundamentales es la seguridad y trazabilidad de los gametos y embriones. En este contexto, la implementación de códigos individuales y el cultivo prolongado hasta el estadio de blastocisto son cruciales para optimizar las tasas de éxito y garantizar la tranquilidad de los pacientes.
Sistemas de Control de Identidad en Laboratorios de Embriología
Los laboratorios de embriología de vanguardia, como el de la clínica Eugin, están equipados con tecnología puntera para garantizar la máxima seguridad. Un ejemplo es el sistema de control de identidad "IVF Witness", que elimina cualquier riesgo de error durante la manipulación de los gametos.
Código Personal Único y Trazabilidad
A cada paciente se le atribuye un código personal único. Este código se utiliza para identificar cada muestra de gametos durante todo el proceso de manipulación, asegurando una trazabilidad a prueba de fallos para gametos y embriones. Además, el sistema dispara una alarma en caso de detección de anomalías, excluyendo completamente el error humano gracias a su automatización.
Sistemas de Trazabilidad con Códigos QR y Radiofrecuencia
En clínicas como Dexeus Mujer, se ha implementado el sistema Gidget, basado en el uso de códigos QR digitalizados desde 2017. Este sistema se activa al obtener cualquier muestra. A la paciente se le coloca una pulsera identificativa con su nombre, apellidos, fecha de nacimiento, número de identificación y un código QR. Las etiquetas con el código QR identificativo de la paciente se colocan en todos los soportes utilizados para las muestras biológicas.
El escáner de códigos QR está programado para rastrear de origen a destino, comprobando la coincidencia de los códigos. Si no coinciden, se registra una incidencia, se bloquea el rastreo y se impide cualquier otra actividad con la muestra hasta que se resuelva. Esto es especialmente crítico durante los cambios de soporte de las muestras, los procesos de congelación y descongelación de gametos y embriones, y la mezcla de gametos para la inseminación.
La automatización de estos sistemas, además de aumentar la seguridad, permite un registro detallado de todas las actividades realizadas, mejora la eficiencia en el trabajo y reduce el estrés emocional de los pacientes.
Amnios In Vitro Project ha incorporado el Código Europeo Único a su sistema de trazabilidad por radiofrecuencia RI Witness™. Este sistema codifica y asocia óvulos, espermatozoides y embriones a cada paciente. La primera parte del código identifica la donación, incluyendo el código ISO del país (ES en España) y el número de establecimiento de tejidos (006079 para Amnios In Vitro Project). La segunda parte identifica el producto de la donación (por ejemplo, E000057 para óvulos vitrificados).
Investigación en Etiquetado Directo de Ovocitos y Embriones
Investigadores de la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB) y del Instituto de Microelectrónica de Barcelona (IMB-CNM-CSIC) han desarrollado un sistema de identificación que permite etiquetar ovocitos y embriones individualmente con códigos de silicio de tamaño microscópico.
Objetivos y Metodología
El objetivo es minimizar el riesgo de error en la identificación de gametos femeninos y embriones durante la fecundación in vitro y la transferencia, así como reducir las fases que requieren la supervisión de dos embriólogos. La investigación ha utilizado códigos de silicio fabricados mediante técnicas de microelectrónica. Estudios previos ya habían demostrado la inocuidad de las partículas de silicio en macrófagos.
Los códigos se insertan por microinyección en el espacio perivitelino de embriones de ratón, un espacio entre la célula embrionaria y la zona pelúcida que la rodea. Dado que el embrión sale de la zona pelúcida antes de la implantación en el útero, se espera que los embriones se liberen de los códigos al abandonar esta zona.
Resultados y Futuras Mejoras
La investigación ha demostrado que los embriones etiquetados se desarrollan correctamente en cultivo hasta el estadio de blastocisto. También se ha estudiado la retención de los códigos durante el cultivo, su facilidad de lectura al microscopio y su eliminación al liberarse de la zona pelúcida. El sistema ha probado su eficacia durante la congelación y descongelación de embriones.
Actualmente, los investigadores trabajan en mejorar el proceso de liberación del embrión del código, la única fase con limitaciones. Se estudia modificar la superficie de los códigos para permitir su adhesión a la parte externa de la zona pelúcida, evitando la microinyección, y desarrollar un sistema de lectura automatizada. Con la autorización del Departamento de Salud de la Generalitat de Cataluña, se espera comenzar a trabajar con ovocitos y embriones humanos de clínicas de reproducción asistida españolas.
Transferencia embrionaria
Cultivo Largo a Blastocisto y su Clasificación
El cultivo largo hasta blastocisto es una práctica cada vez más relevante en los tratamientos de fecundación in vitro, ya que se obtienen mejores tasas de implantación con transferencias en día 5-6 de desarrollo que en estadios más tempranos.
¿Qué es el Cultivo Largo a Blastocisto?
El cultivo embrionario prolongado consiste en mantener los embriones en el laboratorio hasta el día 5 o 6 de su desarrollo, cuando alcanzan el estadio de blastocisto. Durante este tiempo, los embriones se encuentran en un incubador con condiciones óptimas para su desarrollo.
En los blastocistos se diferencian claramente dos estructuras: el trofoectodermo, que forma la placenta al contactar con el endometrio, y la masa celular interna (MCI), de donde se originará el feto.
Tipos de Cultivo para el Desarrollo In Vitro
El cultivo largo puede realizarse con dos tipos de medios:
- Cultivo Secuencial: Los embriones se cultivan en dos medios con composiciones químicas diferentes, adaptadas a los requisitos nutricionales en cada momento del desarrollo. Desde el cigoto (día 1) hasta el día 3 se usa un medio, y luego se transfieren a otro hasta el estadio de blastocisto (día 5-6).
- Cultivo con Medio Global: Los embriones se cultivan en un único medio que contiene todos los nutrientes necesarios desde el día 1 hasta la transferencia o vitrificación en día 5 o 6.
Clasificación de los Blastocistos
La valoración morfológica es uno de los métodos más utilizados para predecir el potencial de implantación. Se evalúan el grado de expansión, la masa celular interna (MCI) y el trofoectodermo. Es necesario que se haya desarrollado el blastocele (cavidad central llena de líquido) para observar las estructuras fácilmente.
La clasificación tradicional asigna un número (1-5) y dos letras (A-D) en función del grado de expansión, la calidad de la MCI y del trofoectodermo, respectivamente (ej. 3AA para un blastocisto expandido de buena calidad).
Grado de Expansión (Categorías Numéricas)
- Grado 1 (blastocisto temprano - BT): el blastocele empieza a visualizarse.
- Grado 2 (blastocisto cavitado - BC): ya es posible distinguir el trofoectodermo y la MCI.
- Grado 3 (blastocisto expandido - BE): el blastocisto ha aumentado su tamaño y la zona pelúcida es más fina.
- Grado 4 (blastocisto iniciando eclosión - hatching, BHi): el blastocisto empieza a salir de la zona pelúcida.
- Grado 5 (blastocisto eclosionado - hatched, BH): el blastocisto ya ha abandonado la zona pelúcida por completo.
Masa Celular Interna (MCI) (Categorías Alfabéticas)
- Categoría A: numerosas células compactadas.
- Categoría B: numerosas células no compactadas.
- Categoría C: pocas células.
- Categoría D: células con signos de degeneración.
Trofoectodermo (Categorías Alfabéticas)
El trofoectodermo debe tener una única capa, y se evalúa su apariencia:
- Categoría A: homogéneo, cohesionado y con muchas células.
- Categoría B: homogéneo y con menos células.
- Categoría C: pocas células.
- Categoría D: células con signos de degeneración.
La Asociación para el Estudio de la Biología de la Reproducción (ASEBIR) ha establecido una clasificación de embriones en día 5, priorizando el trofoectodermo sobre la masa celular interna, usando una única letra para la calidad.
Indicaciones y Beneficios del Cultivo Largo de Embriones
¿Cuándo se recomienda el cultivo largo de embriones?
El cultivo largo no se realiza en todos los casos, sino que se recomienda en situaciones específicas como:
- Ciclos de FIV con un alto número de embriones de buena calidad en el tercer día de desarrollo.
- Casos de fallos repetidos de implantación.
- Pacientes a quienes se les realiza un test genético preimplantacional (PGT).
- Pacientes de edad materna avanzada.
- Pacientes con abortos de repetición.
- Casos en los que se desea evitar gestaciones múltiples.
- Para optimizar los ciclos de vitrificación, ya que solo se congelarán los mejores embriones al esperar al estadio de blastocisto.
Es fundamental una evaluación personalizada de cada paciente y el número de embriones disponibles.
Ventajas del Cultivo a Blastocisto
El cultivo a blastocisto ofrece diversas ventajas que contribuyen a mejorar las tasas de éxito en los tratamientos de fecundación in vitro:
- Aumenta la tasa de implantación: Permite una mejor selección embrionaria.
- Mejor sincronización: Favorece una mejor sincronización entre el desarrollo del embrión y la receptividad endometrial.
- Disminuye el riesgo de gestación múltiple: Permite realizar transferencias de un único embrión sin comprometer las tasas de embarazo.
Limitaciones del Cultivo Largo
A pesar de sus beneficios, el cultivo largo también presenta limitaciones:
- Bloqueo embrionario: Muchos embriones detienen su desarrollo antes de alcanzar el estadio de blastocisto. Aproximadamente entre el 40-60% de los embriones en desarrollo en día 3 (con 6 a 12 células) llegan a blastocisto.
El bloqueo embrionario puede ser causado por una mala calidad ovocitaria y seminal, o por la presencia de anomalías cromosómicas en el ovocito, cuya incidencia aumenta con la edad materna. De hecho, casi el 70% de los embriones que no forman blastocisto presentan anomalías cromosómicas.
Transferencia embrionaria
Evaluación de la Calidad Embrionaria y Probabilidad de Embarazo
La clasificación de los embriones se lleva a cabo según los criterios de valoración establecidos por la Asociación para el Estudio de la Biología Reproductiva (ASEBIR).
Clasificación Embrionaria (Día de la Transferencia)
- Categoría A: Embrión de óptima calidad.
- Categoría B: Embrión de buena calidad.
- Categoría C: Embrión regular.
- Categoría D: Embrión de mala calidad.
Es importante destacar que, aunque la clasificación es una herramienta para valorar la calidad y las posibilidades de gestación, un embrión tipo A no garantiza el éxito, ni un embrión tipo D asegura el fracaso.
Factores que Influyen en la Probabilidad de Embarazo con Blastocisto
La probabilidad de embarazo con un blastocisto depende de varios factores:
- Edad de la paciente: Edades inferiores a 35 años suelen ofrecer tasas de embarazo más elevadas. La donación de óvulos (donantes menores de 35 años) presenta tasas acumuladas cercanas al 90%.
- PGT-A (Test genético preimplantacional de aneuploidías): Permite una selección más eficaz que la clasificación morfológica, identificando embriones que no implantarán. Esto puede igualar las tasas de embarazo entre mujeres de diferentes edades al transferir un embrión sano.
- Clasificación morfológica: Se evalúa la forma del embrión, las divisiones celulares, la fragmentación y la masa celular interna y el trofoectodermo. Cada laboratorio tiene sus propios resultados en función del tipo de embrión.
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